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人CXC趨化因子配體1（CXCL1）ELISA實(shí)驗(yàn)操作手冊(cè)
趨化因子(C-X-C基序)配體1(CXCL1)是一個(gè)小分子量細(xì)胞因子，屬于CXC趨化因子家族，以前又被稱為GRO1致癌基因、GROα、KC和中性粒細(xì)胞激活蛋白3(NAP-3)。那么在ELISA實(shí)驗(yàn)中有哪些注意事項(xiàng)呢，恒遠(yuǎn)生物小編為大家總結(jié)ELISA實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)。
檢測(cè)范圍：
12ng/L - 420ng/L
使用目的：
本試劑盒用于測(cè)定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中CXC趨化因子配體1（CXCL1）含量。
實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人CXC趨化因子配體1（CXCL1）水平。用純化的人CXC趨化因子配體1（CXCL1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入CXC趨化因子配體1（CXCL1），再與HRP標(biāo)記的CXC趨化因子配體1（CXCL1）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CXC趨化因子配體1（CXCL1）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人CXC趨化因子配體1（CXCL1）濃度。
注意事項(xiàng)：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
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